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色谱柱使用过程中常见问题的原因及解决

更新时间:2017-05-09 点击次数:2296
液相 色谱柱在使用过程中zui容易碰到的问题就是柱压升高。如果柱压是在长时间使用过程中缓慢地增加,通常这属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高(系统管路堵塞除外),可能的原因有如下几点:
①色谱柱头中过滤筛板中的2#部件污染
②色谱柱头内的填料被污染
③色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂, 形成结晶析出
流动相PH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解,解决方法如下:
①当断定是色谱柱头中过滤筛板污染时,可将柱头螺丝卸下, 取出过滤筛板, 并将其放置在30%左右的稀硝酸内,用超声波超声清洗约10分钟后,再用超纯水超声约10分钟, 重新装人色谱柱内。
②当断定是色谱柱头内的填料被污染时,可将柱头螺丝卸下用小匙挖出柱内前段被污染的填料, 用相同的柱填料重新填人,仔细修复后重新安装上柱头螺丝,或以能溶解污染物的流动相,按色谱柱使用的相反方向,冲洗色谱柱(流动相的冲洗量为20至30倍色谱柱体积或视具体情况而定)。另外,此时不要连接检测器, 将污染物冲出色谱柱, 再按色谱柱标明的箭头方向使用色谱柱上箭头方向说明色谱评价是按此方向价。 因此使用时按此方向价。
③当断定是盐结晶时,用水冲洗色谱柱,使柱内盐全部溶解并被冲洗出色谱柱, 再换用含高浓度甲醇或其他有机溶剂的流动相。
④如果是因使用的流动相PH值控制不当,通常很难将色谱柱恢复。 有一点必须注意一旦色谱柱头被打开,即便是经过很仔细地修复都很难恢复到原有新柱水平。
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